JavaScript hiện không khả dụng trên trình duyệt của bạn.Một số tính năng của trang web này sẽ không hoạt động nếu JavaScript bị tắt.
Đăng ký với các chi tiết cụ thể của bạn và loại thuốc cụ thể mà bạn quan tâm, và chúng tôi sẽ khớp thông tin bạn cung cấp với các bài báo trong cơ sở dữ liệu phong phú của chúng tôi và gửi email cho bạn một bản PDF ngay lập tức.
Ding Jingnuo, Zhao Weifeng, Khoa Truyền nhiễm, Bệnh viện trực thuộc Đại học Tô Châu, thành phố Tô Châu, tỉnh Giang Tô, 215000 Tel.khối u của hệ tiêu hóa với tỷ lệ sống sót sau 5 năm là 14,1%.Nhiều bệnh nhân mắc ung thư biểu mô tế bào gan được chẩn đoán ở giai đoạn cuối, vì vậy việc tầm soát sớm là điều cần thiết để giảm tỷ lệ tử vong do ung thư biểu mô tế bào gan.Ngoài các chỉ số phát hiện thường được sử dụng như alpha-fetoprotein huyết thanh (AFP), alpha-fetoprotein phản ứng thấu kính (AFP-L3), và prothrombin bất thường (protein II do thiếu hụt vitamin K, PIVKA-II), kỹ thuật sinh thiết dịch Nó đã được chứng minh là có giá trị chẩn đoán trong việc phát hiện HCC.So với các thủ tục xâm lấn, sinh thiết chất lỏng có thể phát hiện các chất chuyển hóa ác tính đang lưu hành.Kỹ thuật sinh thiết chất lỏng phát hiện các tế bào khối u lưu hành, DNA khối u lưu hành, RNA tuần hoàn, và các exosomes và được sử dụng để sàng lọc, chẩn đoán sớm và đánh giá tiên lượng HCC.Bài báo này xem xét sinh học phân tử và ứng dụng của các kỹ thuật sinh thiết chất lỏng khác nhau để phân lập các dấu ấn sinh học hứa hẹn có thể là những lựa chọn khả thi để đánh giá sớm HCC nhằm cải thiện việc sàng lọc sớm các nhóm HCC có nguy cơ cao.Từ khóa: kỹ thuật sinh thiết dịch, ung thư biểu mô tế bào gan, nhóm nguy cơ cao.
Ung thư biểu mô tế bào gan (HCC) là một khối u ác tính phổ biến của đường tiêu hóa, đứng hàng thứ sáu trong số các trường hợp u ác tính mới ở cả nam và nữ.1 Trên thế giới, ung thư gan là nguyên nhân gây tử vong do ung thư đứng hàng thứ ba sau ung thư phổi và đại trực tràng, chiếm 8,3% các ca tử vong liên quan đến ung thư do tất cả các khối u ác tính.1 Tiên lượng của ung thư biểu mô tế bào gan có liên quan chặt chẽ đến giai đoạn chẩn đoán.Các lý do chính dẫn đến tỷ lệ sống kém ở HCC là di căn trong gan, huyết khối khối u tĩnh mạch cửa, và di căn xa không thể cắt bỏ, và nhiều đặc điểm này đã có ở bệnh nhân tại thời điểm chẩn đoán.
Dựa trên các hướng dẫn chẩn đoán và điều trị, các yếu tố nguy cơ chính phát triển HCC là xơ gan, nhiễm vi rút viêm gan B mãn tính (HBV) hoặc nhiễm vi rút viêm gan C (HCV), bệnh gan nhiễm mỡ do rượu và bệnh gan nhiễm mỡ không do rượu (NAFLD ).2 Ngoài ra, các yếu tố nguy cơ đối với HCC bao gồm ăn thực phẩm nhiễm aflatoxin, nhiễm sán máng, các nguyên nhân khác gây xơ gan, tiền sử gia đình mắc bệnh ung thư gan, tiểu đường, béo phì, hút thuốc và tổn thương gan do thuốc.Nhóm nguy cơ cao 35, 45 tuổi nên đi khám sức khỏe định kỳ.Sàng lọc sớm là một chiến lược điều trị sớm quan trọng để cải thiện sự sống còn chung của bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan.
Các dấu ấn sinh học như AFP, AFP-L3 và PIVKA-II được khuyến cáo để sàng lọc sớm HCC3,4.Kỹ thuật sinh thiết lỏng đã cho kết quả đầy hứa hẹn trong việc đánh giá chẩn đoán và điều trị sớm.5,6 Đã có tiến bộ đáng kể trong sinh thiết HCC lỏng, có thể có độ nhạy và độ đặc hiệu cao hơn các chất chỉ điểm huyết thanh thường được sử dụng như AFP (Bảng 1).
AFP là một dấu ấn sinh học được sử dụng rộng rãi trong HCC và hiện là dấu ấn sinh học chi tiết nhất được sử dụng rộng rãi để sàng lọc, chẩn đoán sớm và đánh giá bệnh.Mức AFP liên tục tăng cao được coi là một yếu tố nguy cơ cho sự tiến triển của HCC.7,8 Tỷ lệ phát hiện ung thư biểu mô tế bào gan nhỏ (sHCC) ngày càng tăng với sự phát triển của siêu âm và chụp cắt lớp vi tính, và AFP được cho là đặc biệt không nhạy đối với việc phát hiện hHCC trong thực hành lâm sàng.Theo một nghiên cứu đa trung tâm hồi cứu9, AFP dương tính được tìm thấy trong 46% (616/1338) trường hợp ung thư biểu mô tế bào gan và 23,4% (150/641) trường hợp sHCC.Ngoài ra, nồng độ AFP tăng cao ở những bệnh nhân bị bệnh gan mãn tính và xơ gan.10 Do đó, AFP có tác dụng sàng lọc hạn chế đối với sHCC.11 Theo Hướng dẫn Thực hành Lâm sàng Châu Á - Thái Bình Dương về Ung thư Biểu mô Tế bào Gan, việc sử dụng AFP không được khuyến khích.12 Bằng chứng lâm sàng cho thấy PIVKA-II tốt hơn AFP trong điều trị HCC và sự kết hợp của PIVKA-II và AFP có giá trị chẩn đoán cao hơn trong HCC.13 So với sinh thiết mô, sinh thiết chất lỏng chủ yếu phát hiện các chất chuyển hóa liên quan đến khối u trong dịch cơ thể (máu, nước bọt, dịch màng phổi, dịch não tủy hoặc nước tiểu) và ít xâm lấn đến các mô.14 Ngoài ra, sinh thiết lỏng có thể phản ánh các đặc điểm ác tính không có trong mô khối u nguyên phát.15 Sinh thiết lỏng vẫn chưa được thử nghiệm trên thực tế lâm sàng đối với tất cả các loại khối u, nhưng khả năng chẩn đoán ung thư của chúng đang thu hút sự chú ý của các bác sĩ chuyên khoa ung thư.16 Sinh thiết chất lỏng có thể phát hiện các tế bào khối u lưu hành (CTC), ADN khối u lưu hành (cDNA), ARN tự do lưu hành (ecRNA) và các exosomes.Trong bài viết này, chúng tôi sẽ thảo luận về các đặc điểm, vai trò và ứng dụng của các kỹ thuật sinh thiết dịch khác nhau trong việc sàng lọc sớm các nhóm ung thư biểu mô tế bào gan có nguy cơ cao.
DNA ngoại bào (cfDNA) trong mẫu máu của những người khỏe mạnh lần đầu tiên được mô tả vào năm 1948 bởi Mandel et al.17 cfDNA là một đoạn DNA không tế bào có chiều dài khoảng 160–180 bp, có nguồn gốc chủ yếu từ tế bào lympho và tế bào dòng tủy.ctDNA là một đoạn DNA đột biến cụ thể do tế bào khối u phóng thích vào máu ngoại vi, đại diện cho thông tin bộ gen của tế bào khối u sau một số quá trình sinh lý bệnh nhất định, bao gồm hoại tử, chết theo chương trình và bài tiết.Tỷ lệ ctDNA trong tổng số cfDNA rất khác nhau tùy theo loại khối u, và các đoạn cDNA thường có chiều dài nhỏ hơn 167 bp.18 Nghiên cứu của Underhill chỉ ra rằng các đoạn cfDNA thường ngắn hơn cfDNA bình thường.19 So với những người khỏe mạnh, tổng chiều dài của các đoạn cfDNA trong máu của bệnh nhân ung thư ngắn hơn, vì vậy cfDNA có thể được sử dụng như một chỉ số để tầm soát khối u sớm.Việc tăng cường các tập hợp con nhất định của độ dài đoạn cfDNA có thể cải thiện việc phát hiện cDNA liên quan đến các khối u rắn không di căn.Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng ctDNA được tìm thấy trong hơn 75% các trường hợp ung thư tuyến tụy, ruột kết, bàng quang, đường tiêu hóa, gan, buồng trứng, vú, u ác tính và ung thư đầu và cổ.20,21 Tuy nhiên, lượng ctDNA trong máu phụ thuộc vào vị trí của khối u.22 Trong một nghiên cứu của Bettegoud, những bệnh nhân bị ung thư đại trực tràng, vú, gan, phổi và tuyến tiền liệt được phát hiện có nồng độ cDNA trong máu cao hơn các bệnh ung thư khác.Ngược lại, ở những bệnh nhân ung thư miệng, ung thư tuyến tụy, ung thư dạ dày và u thần kinh đệm, nồng độ cDNA trong máu thấp hơn.hai mươi mốt
Vì ctDNA chứa các đột biến di truyền giống như các tế bào khối u nguyên phát, cDNA có thể được sử dụng để phát hiện các đột biến không đồng nhất dành riêng cho khối u và các thay đổi biểu sinh, bao gồm methyl hóa, hydroxymethyl hóa, các biến thể nucleotide đơn và các biến thể số lượng bản sao.hai mươi ba
Sự methyl hóa DNA là một trong những thay đổi biểu sinh phổ biến nhất dẫn đến sự ức chế gen.So với các tế bào bình thường, có sự khác biệt về mức độ methyl hóa tổng thể của bộ gen tế bào khối u, đặc biệt là quá trình methyl hóa các gen ức chế khối u, có thể được phát hiện ở giai đoạn sớm, cho thấy những thay đổi trong quá trình methyl hóa DNA có thể là dấu hiệu sớm. phát hiện khối u.Các gen ức chế khối u liên quan đến HCC có thể bị bất hoạt bởi quá trình methyl hóa promoter, do đó kích thích sự hình thành khối u.24 Sự methyl hóa DNA là một dấu hiệu lý tưởng để chẩn đoán sớm các khối u do tính đặc hiệu của mô, khả năng phát hiện và không phụ thuộc vào tuổi của nó.Ngoài ra, sự methyl hóa DNA phổ biến hơn so với đột biến soma vì có nhiều vùng đích hơn và một số vị trí CpG bị thay đổi trong mỗi vùng của bộ gen đích.25 Ngoài nhiều vị trí CpG, một số lượng lớn các locus siêu methyl hóa độc lập trong ctDNA đã được xác định trong DBX2, THY1, MT1M, INK4A, VIM, FBLN1 và RGS10.26 Xu et al.So sánh các mẫu cfDNA từ 1098 bệnh nhân HCC và 835 đối chứng khỏe mạnh cho thấy các gen liên quan đến HCC có tương quan chặt chẽ với các dấu hiệu methyl hóa cDNA huyết tương tương ứng.25 Dựa trên phân tích trong phòng thí nghiệm, một mô hình dự đoán đã được phát triển chứa 10 dấu hiệu methyl hóa với độ nhạy và độ đặc hiệu lần lượt là 85,7% và 94,3%, và các dấu hiệu này có tương quan cao với khối lượng khối u, giai đoạn khối u và đáp ứng với điều trị.Những kết quả này chỉ ra rằng việc sử dụng các dấu hiệu methyl hóa cDNA có nhiều hứa hẹn trong chẩn đoán, theo dõi và tiên lượng HCC.Trong một mô hình methyl hóa bao gồm ba gen được methyl hóa không bình thường (APC, COX2, RASSF1A) và một miRNA (miR203) do Lu et al27 trình bày, độ nhạy và độ đặc hiệu của mô hình 27 để chẩn đoán HCC liên quan đến HBV là tương đương nhau.80%.Ngoài ra, mô hình có thể phát hiện 75% bệnh nhân HCC chưa được chẩn đoán với mức AFP là 20 ng / mL.Gen cho protein 1A thuộc họ miền liên kết Ras (RASSF1A) là chuỗi DNA lặp lại chính trong bộ gen người.Araujo và cộng sự.kết luận rằng sự tăng methyl hóa của promoter RASSF1A có thể là một dấu ấn sinh học có giá trị để sàng lọc sớm HCC và là mục tiêu phân tử tiềm năng cho liệu pháp biểu sinh.28 Trong một nghiên cứu, quá trình tăng methyl hóa promoter RASSF1A trong huyết thanh được tìm thấy ở 73,3% bệnh nhân mắc ung thư biểu mô tế bào gan.29 Phần tử nucleotide dài xen kẽ 1 (LINE-1) là một chất trung gian tái chuyển vị tích cực khác.Hypomethyl hóa LINE-1 được tìm thấy trong DNA của 66,7% mẫu huyết thanh HCC và có liên quan đến tái phát sớm và tỷ lệ sống kém sau khi cắt bỏ tận gốc.29 Hypermethylation là một quá trình di truyền phổ biến đóng một vai trò duy nhất trong sự phát triển của bệnh xơ gan và ung thư biểu mô tế bào gan.30 Ngược lại, hydroxymethyl hóa là một quá trình khử methyl để kích hoạt lại và biểu hiện gen, và việc phát hiện sản phẩm 5-hydroxymethylcytosine (5-hmC) trong quá trình này có thể được sử dụng để xác định khối u.Methyl hóa và hydroxymethyl hóa cDNA có liên quan đến sự hình thành khối u và có thể góp phần vào việc sàng lọc sớm HCC.Trong một nghiên cứu trên 2554 đối tượng, 31 gen 5 hmC được tìm thấy trong các mẫu cfDNA và 32 gen được xác định bằng cách so sánh trình tự 5 hmC ở bệnh nhân HCC và các nhóm nguy cơ cao như những người mắc bệnh mãn tính.Các mô hình chẩn đoán các bệnh về gan.và xơ gan.Mô hình này vượt trội hơn AFP trong việc phân biệt HCC với mô không phải khối u.
Các đột biến trong vùng mã hóa có thể dẫn đến bất thường phiên mã, có thể dẫn đến thay đổi trình tự protein và cuối cùng là ung thư.Các biến thể nucleotide đơn là dấu hiệu di truyền quan trọng để sàng lọc khối u sớm do độ tin cậy của mô cao và độ đặc hiệu của khối u và mô cao.Nhiều nghiên cứu liên quan đến HCC sử dụng giải trình tự thế hệ tiếp theo (NGS) để giải trình tự gen ngoại lai và toàn bộ bộ gen của bệnh ung thư đã xác định được các gen tế bào bị đột biến phổ biến như TP53 và CTNNB1, cũng như một số gen bao gồm ARID1A, MLL, IRF2.Các gen mới, ATM, CDKN2A, FGF19, PIK3CA, RPS6KA3 và JAK1 cho thấy tỷ lệ đột biến trung bình. Phân tích chức năng gen đột biến cho thấy rằng những thay đổi trong tái cấu trúc nhiễm sắc, truyền tín hiệu Wnt / β-catenin và JAK / STAT, con đường chu kỳ tế bào P53, các chất điều chỉnh biểu sinh, con đường stress oxy hóa, con đường PI3K / AKT / MTOR và RAS / RAF / Con đường MAPK kinase đóng vai trò quan trọng trong quá trình sinh ung thư HCC.32,33 Trong một nghiên cứu phát hiện các đột biến liên quan đến khối u, Huang và cộng sự nhận thấy rằng tần suất đột biến liên quan đến khối u phụ thuộc vào ctDNA là 19,5% và độ đặc hiệu là 90%. .34 Ngoài ra, những bệnh nhân từng bị xâm lấn mạch máu có nhiều khả năng bị đột biến ctDNA hơn (P = 0,041) và thời gian sống không tái phát ngắn hơn (P <0,001). Phân tích chức năng gen đột biến cho thấy rằng những thay đổi trong tái cấu trúc nhiễm sắc, truyền tín hiệu Wnt / β-catenin và JAK / STAT, con đường chu kỳ tế bào P53, các chất điều chỉnh biểu sinh, con đường stress oxy hóa, con đường PI3K / AKT / MTOR và RAS / RAF / Con đường MAPK kinase đóng vai trò quan trọng trong quá trình sinh ung thư HCC.32,33 Trong một nghiên cứu phát hiện các đột biến liên quan đến khối u, Huang và cộng sự nhận thấy rằng tần suất đột biến liên quan đến khối u phụ thuộc vào ctDNA là 19,5% và độ đặc hiệu là 90%. .34 Ngoài ra, những bệnh nhân từng bị xâm lấn mạch máu có nhiều khả năng bị đột biến ctDNA hơn (P = 0,041) và thời gian sống không tái phát ngắn hơn (P <0,001).Phân tích chức năng gen đột biến cho thấy rằng những thay đổi trong quá trình tái cấu trúc nhiễm sắc, tín hiệu Wnt / β-catenin và JAK / STAT, con đường chu kỳ tế bào P53, chất điều chỉnh biểu sinh, con đường stress oxy hóa, con đường PI3K / AKT / MTOR và con đường kinase RAS / RAF / MAPK một vai trò quan trọng trong sự hình thành khối u HCC.32,33 Trong một nghiên cứu tìm thấy các đột biến liên quan đến khối u, Huang et al.nhận thấy tần số đột biến liên quan đến khối u phụ thuộc ctDNA là 19,5% và độ đặc hiệu là 90%..34 Кроме того, у пациентов с сосудистой инвазией чаще встречались мутации цДНК (P = 0,041) и болежния ивекоя (0,001 .34 Ngoài ra, bệnh nhân bị xâm lấn mạch máu có nhiều đột biến cDNA hơn (P = 0,041) và thời gian sống không bệnh ngắn hơn (P <0,001).Phân tích chức năng của các gen đột biến cho thấy quá trình tái cấu trúc nhiễm sắc, tín hiệu Wnt / β-catenin và JAK / STAT, con đường chu kỳ tế bào P53, các chất điều chỉnh biểu sinh, con đường stress oxy hóa, con đường PI3K / AKT / MTOR và RAS / RAF / MAPK con đường kinase đóng một vai trò quan trọng trong quá trình sinh ung thư của HCC. 32,33 在 一项 检测 到 肿瘤 相关 突变 的 研究 中 ， Huang 等 人 发现 肿瘤 相关 突变 依赖 于 ctDNA 的 频率 为 19,5% ， 特异性 为 90% .34 此外 ， 经历 血管 侵犯 的 患者 更有 可能 发生 ctDNA突变 （P = 0,041） 和 更 短 的 无 复发 生存 期 （P <0,001）。 32,33 在 一 项 检测 到 相关 突变 的 研究 ， 发现 肿瘤 相关 突变 依赖 于 ctdna 的 为 为 19,5% ， 特异性 为 90% .34 此外 经历 血管 侵犯 的 更 可能 发生 ctdna 突变 （P = 0,041） 和 更短 的 无 复发 生存 期 （P <0,001）。32,33 Trong một nghiên cứu tìm thấy các đột biến liên quan đến khối u, Huang et al.phát hiện ra rằng các đột biến liên quan đến khối u phụ thuộc 19,5% vào cDNA với độ đặc hiệu là 90%.мутация (P = 0,041) и более короткая безрецидивная выживаемость (P <0,001). đột biến (P = 0,041) và thời gian sống sạch bệnh ngắn hơn (P <0,001).Một gen điều khiển HCC phổ biến khác là TP53, có tỷ lệ đột biến trên 30%.Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng tần suất TP53 đột biến ctDNA trong máu và nước tiểu dao động từ 5% đến 60%.35 Nghiên cứu của Johan cho thấy phổ đột biến ctDNA ở HCC muộn có tỷ lệ đột biến tương tự như HCC sớm, bao gồm promoter TERT (51%), TP53 (32%), CTNNB1 (17%), PTEN (8%), đột biến ở AXIN1., ARID2, KMT2D và TSC2 (6% mỗi loại).36 Gen sinh ung thư β-catenin (CTNNB1) đóng một vai trò quan trọng trong lộ trình tín hiệu Wnt.Chất coactivator phiên mã CTNNB1 có thể thúc đẩy biểu hiện gen, có thể dẫn đến tăng sinh tế bào, ức chế quá trình apoptosis và hình thành mạch.CTNNB1 cũng có thể tương tác với TERT để tạo ra sự biến đổi tế bào gan.33 promoter TERT thường xuyên bị đột biến trong một số khối u rắn.Những thay đổi trong TERT, một trong những thay đổi di truyền sớm nhất trong quá trình chuyển đổi ác tính của HCC, có thể dẫn đến tái hoạt hóa telomerase trong tế bào gan xơ gan và có thể thúc đẩy tăng sinh và ngăn ngừa lão hóa.Các đột biến trong promoter 33-37 TERT đã được báo cáo xảy ra ở 59-90% bệnh nhân có nốt gan tăng sinh và ung thư biểu mô tế bào gan sớm và có liên quan đến khả năng sống sót.38
Thay đổi số lượng sao chép (CNA) là một dạng phụ quan trọng của đột biến xôma.Nghiên cứu đã chỉ ra rằng gánh nặng lan rộng và khu trú của CNA là một dấu hiệu gen có khả năng dự đoán sự xâm nhập và loại trừ miễn dịch của khối u trong một số loại ung thư.39 Truyền tín hiệu xâm nhập tích cực, hoạt động phân giải tế bào cao, tình trạng viêm nặng và các dấu hiệu di truyền liên quan đến sự trình diện kháng nguyên trong ung thư biểu mô tế bào gan.Phân tích mảng dữ liệu về đa hình nucleotide đơn ở 477 đối tượng cho thấy một gánh nặng thấp đối với thần kinh trung ương.Ngược lại, các khối u không ổn định về nhiễm sắc thể với tải trọng CNA mở rộng cao có dấu hiệu từ chối miễn dịch và có liên quan đến tăng sinh, sửa chữa DNA và rối loạn chức năng TP53.Xu và cộng sự.cho thấy nhóm HCC có điểm CNA cao hơn nhóm bệnh gan mãn tính.40 Sử dụng giải trình tự toàn bộ bộ gen của một tế bào đơn lẻ, CNA được phát hiện xuất hiện sớm trong quá trình hình thành ung thư gan và vẫn tương đối ổn định trong quá trình phát triển của khối u.41 Chung và cộng sự.phát hiện ra rằng nồng độ cfDNA đã tăng lên đáng kể ở bệnh nhân HCC và CNA trên toàn bộ bộ gen trong cfDNA là một dấu hiệu tiên lượng độc lập quan trọng ở bệnh nhân HCC được điều trị bằng sorafenib.42 Bệnh nhân có gánh nặng thần kinh trung ương cao hơn có nhiều khả năng bị bệnh tiến triển và tử vong hơn những bệnh nhân có gánh nặng thần kinh trung ương thấp hơn.Ollerich và cộng sự.phát hiện ra rằng chỉ số không ổn định số bản sao (CNI) có thể được sử dụng để đánh giá CNA trong cfDNA của bệnh nhân ung thư.Họ lưu ý rằng những bệnh nhân bị ung thư giai đoạn muộn có điểm CNI cao hơn đáng kể so với nhóm đối chứng, đánh giá phản ứng của bệnh nhân với hóa trị liệu toàn thân và liệu pháp miễn dịch.43 Những kết quả này cho thấy CNA được tìm thấy trong các mẫu sinh thiết lỏng có thể dùng làm chỉ số tiên lượng ở bệnh nhân ung thư giai đoạn muộn.HCC trên nền của liệu pháp toàn thân.
Hiện tại, các phương pháp được sử dụng để phát hiện ctDNA có thể được chia thành các phương pháp nhắm mục tiêu và không nhắm mục tiêu.Tóm lại, các phương pháp được nhắm mục tiêu như phản ứng chuỗi polymerase kỹ thuật số (dPCR), PCR kỹ thuật số BEAMing, Hệ thống đột biến chịu lửa khuếch đại-PCR, Capp-Seq và Tam-Seq rất nhạy cảm với các gen được xác định trước.Các phương pháp ngoài mục tiêu như giải trình tự toàn bộ bộ gen và NGS cung cấp một cái nhìn toàn diện về toàn bộ bối cảnh bộ gen.44 So với bảng điều khiển đích, giải trình tự toàn bộ bộ gen không chỉ có thể phát hiện các đột biến điểm và phần chèn mà còn có thể sắp xếp lại và sao chép các biến thể số lượng.tiên lượng, và CTC và cfDNA là những chỉ số tốt có thể được sử dụng để theo dõi động học của HCC.45 Ngoài ra, phân tích cfDNA có thể hữu ích hơn trong việc phát hiện HCC.Yan và cộng sự.cho thấy rằng cfDNA trong huyết tương của bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan cao hơn đáng kể so với bệnh nhân xơ hóa gan và nhóm chứng khỏe mạnh.So với AFP, ctDNA được cho là dấu hiệu sàng lọc tốt hơn cho ung thư biểu mô tế bào gan sớm.46 Trong một nghiên cứu tiền cứu trên 47 mẫu sinh thiết lỏng kiểm tra cfDNA và protein trong quần thể, chúng đã được chứng minh là có hiệu quả trong việc phân biệt bệnh nhân mắc ung thư biểu mô tế bào gan với bệnh nhân không mắc bệnh ung thư biểu mô tế bào gan.Trong một cuộc theo dõi trên 331 bệnh nhân bình thường và âm tính với AFP trên siêu âm, độ nhạy và độ đặc hiệu của cfDNA để chẩn đoán HCC lần lượt là 100% và 94%, vì vậy cDNA có thể phát hiện HCC ở những người huyết thanh dương tính với HBsAg không có triệu chứng.Trong nghiên cứu Yeo48, tần suất cao (92,5%) của quá trình hypermethyl hóa của promoter RASSF1A được tìm thấy ở những bệnh nhân mắc ung thư biểu mô tế bào gan.Ngoài ra, Xu et al.đã tạo ra một mô hình chẩn đoán để dự đoán HCC bằng cách sử dụng một bảng các dấu hiệu methyl hóa cụ thể với độ đặc hiệu và độ nhạy tương ứng là 90,5% và 83,3%.Bảng điều khiển cho phép phân biệt bệnh nhân mắc ung thư biểu mô tế bào gan với bệnh nhân mắc các bệnh gan khác, điều này tốt hơn so với AFP.Họ cũng phát hiện ra rằng các đối chứng bình thường có kết quả dương tính có thể có các yếu tố nguy cơ đối với HCC, chẳng hạn như nhiễm HBV hoặc tiền sử sử dụng rượu.25 Chúng tôi giả thuyết rằng các yếu tố nguy cơ cao đối với HCC có thể thúc đẩy quá trình siêu methyl hóa cfDNA, sau đó góp phần vào sự tiến triển của HCC, và do đó cfDNA có thể đóng một vai trò quan trọng trong việc sàng lọc các nhóm nguy cơ cao.Cai và cộng sự.tóm tắt đầy đủ các đột biến ctDNA và đưa ra một chiến lược mạnh mẽ để đánh giá gánh nặng khối u ở bệnh nhân.49 Chiến lược này có thể xác định khối u trung bình 4,6 tháng trước khi thay đổi hình ảnh và đã cho thấy hiệu quả chẩn đoán cao hơn so với các dấu ấn sinh học trong huyết thanh AFP, AFP-L3 và PIVKA-II.Giá trị chẩn đoán của xét nghiệm cDNA đã được chứng minh khi không có đánh giá hình ảnh, vì vậy xét nghiệm cDNA có giá trị trong chẩn đoán ung thư biểu mô tế bào gan sớm ở các nhóm nguy cơ cao.Gần đây, các nhà khoa học đã sử dụng công nghệ NGS để phân tích các chỉ số về biến thể di truyền đa biến (bao gồm 5-hydroxymethylcytosine, 5′-motif, phân mảnh, dấu vết nucleosome, HIFI) trong 3204 mẫu lâm sàng và cfDNA.50 mô hình HIFI đã được xác nhận lại với ba bộ thử nghiệm, thử nghiệm và huấn luyện độc lập cho thấy sự phân biệt ổn định và đáng tin cậy giữa các quần thể HCC và không HCC với độ nhạy lần lượt là 95,79% và 95,42% trong các bộ thử nghiệm và thử nghiệm dành riêng cho HCC.Hai giới lần lượt là 95,00% và 97,83%.Giá trị chẩn đoán của phương pháp HIFI cao hơn AFP trong việc phân biệt ung thư biểu mô tế bào gan với xơ gan.Ngoài ra, ctDNA còn được sử dụng trong điều trị phẫu thuật.Atsushi và cộng sự.xác định nồng độ ctDNA huyết thanh trước phẫu thuật ở bệnh nhân HCC và thấy rằng tỷ lệ tái phát và tỷ lệ di căn ngoài gan ở nhóm cDNA dương tính cao hơn đáng kể so với nhóm cDNA âm tính, và nồng độ cDNA có mối tương quan đáng kể.với sự tiến triển của khối u.51 Là một dấu ấn sinh học có độ nhạy cao, ctDNA có thể dự đoán khả năng HCC xâm nhập vào mạch máu.Wang và cộng sự.thực hiện giải trình tự toàn bộ bộ gen của 46 bệnh nhân HCC, và phân tích đa biến cho thấy giá trị ngưỡng tần số alen của biến thể cDNA xâm nhập vào vi mạch là 0,83%, độ nhạy 89,7% và độ đặc hiệu 80,0%.một yếu tố nguy cơ độc lập đối với sự xâm lấn vi mạch trong HCC có thể cắt lại được, cho thấy rằng cDNA có thể giúp hướng dẫn điều trị tối ưu.Kết luận, ctDNA hoàn toàn liên quan đến sự xuất hiện và phát triển của HCC và có thể được sử dụng để sàng lọc sớm, đánh giá phẫu thuật và theo dõi bệnh.
CTC là những tế bào ác tính xuất phát từ khối u nguyên phát hoặc khối u di căn theo đường máu.Tế bào khối u tiết ra metalloproteinase ma trận (MMPs), chất này phá vỡ màng đáy, cho phép các tế bào khối u xâm nhập trực tiếp vào máu và mạch bạch huyết.Tuy nhiên, hầu hết các CTC bị đào thải nhanh chóng bởi anoikis, tấn công miễn dịch hoặc căng thẳng cắt.53 Sự chuyển đổi biểu mô-trung mô (EMT) cho phép các CTC dễ dàng được phân lập khỏi mô khối u nguyên phát, xâm lấn các mao mạch và cải thiện đáng kể khả năng sống sót, di căn, xâm lấn và kháng thuốc.Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng có sự không đồng nhất sâu sắc giữa các tế bào khối u khác nhau trong các khối u di căn nguyên phát.Do đó, phân tích CTC có thể dẫn đến sự hiểu biết toàn diện về tính không đồng nhất của tế bào khối u.54
Các dấu hiệu cụ thể cho các CTC liên quan đến HCC bao gồm glypican-3 (GPC3), thụ thể asialoglycoprotein (ASGPR), phân tử kết dính tế bào biểu mô (EpCAM) và các dấu hiệu liên kết với tế bào gốc như CD44, CD90, 55 và phân tử kết dính gian bào 1 (ICAM1).) .56 Điểm đánh dấu GPC3 là một protein neo vào màng tế bào được sử dụng trong lâm sàng để phân tích bệnh lý và mô tả đặc điểm của HCC.57 Sự biểu hiện của GPC3 phổ biến hơn ở các tế bào khối u HCC với sự biệt hóa trung gian và thấp và thúc đẩy sự di cư ngoài gan;Ngoài ra, sự hiện diện của GPC3 + CTC cho thấy HCC di căn.58 ASGPR là một protein xuyên màng chỉ biểu hiện trên bề mặt tế bào gan và được biểu hiện nhiều trong HCC biệt hóa tốt.EpCAM là một trong những protein liên kết màng được sử dụng phổ biến nhất để bắt giữ các CTC.EpCAM đã được xác định là dấu hiệu bề mặt của tế bào HCC với các đặc điểm tế bào gốc, 59 tương quan với các đặc điểm bệnh lý lâm sàng khác nhau của HCC, chẳng hạn như xâm lấn mạch máu, đánh giá mức AFP và giai đoạn tiến triển của ung thư gan tại Bệnh viện Barcelona (BCLC).Kiểu hình 60 CTC EMT có khả năng di căn cao.54 Quá trình EMT trong CTC thúc đẩy sự di căn của HCC.Sự biểu hiện của các dấu hiệu EMT như vimentin, xoắn, liên kết ngón tay kẽm hộp E (ZEB) 1, ZEB2, ốc sên, sên, và E-cadherin đã được nghiên cứu trong các CTC có nguồn gốc từ gan của bệnh nhân HCC.58 Hệ thống CanPatrol ™ do Cheng [61] phát triển đã phân loại các CTC thành ba phân nhóm kiểu hình dựa trên các dấu hiệu được biểu hiện chủ yếu: kiểu hình biểu mô (EpCAM, CK8 / 18/19), kiểu hình trung mô (vimentin, cuộn lại) và kiểu hình hỗn hợp.Ở 176 bệnh nhân, CTC cao hơn AFP trong việc phân biệt HCC với bệnh gan lành tính.Các giá trị AUC cho tổng CTC, AFP và tổng CTC và AFP kết hợp là 0,774 (95% CI, 0,704–0,834), 0,669 (95% CI, 0,587–0,750) và 0,821 (95% CI, 0,756–0,886 ).), tương ứng.Phân loại CTC dựa trên EMT có thể dự đoán chẩn đoán HCC, tái phát sớm, di căn và thời gian tổng thể ngắn hơn.
Hiện nay, các phương pháp phát hiện CSC bao gồm phương pháp vật lý và phương pháp sinh học.Các phương pháp vật lý, thường được gọi là làm giàu dựa trên các đặc tính lý sinh, chủ yếu phụ thuộc vào các tính chất vật lý của CSC, chẳng hạn như kích thước, mật độ, điện tích, tính di động và khả năng biến dạng.Tùy thuộc vào tính chất vật lý, có nhiều phương pháp khác nhau như hệ thống dựa trên lọc, điện di, v.v. Phương pháp sau, còn được gọi là làm giàu dựa trên ái lực miễn dịch, chủ yếu dựa trên liên kết kháng nguyên-kháng thể vì phương pháp sử dụng kháng thể chống lại các dấu ấn sinh học đặc hiệu của khối u chẳng hạn như EpCAM, ASGPR, thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì ở người 2 (HER2), kháng nguyên đặc hiệu của tuyến tiền liệt (PSA), pancytokeratin của người (P-CK) và carbamoyl phosphate synthase 1 (CPS1).62 Một loại khác, được gọi là phương pháp không làm giàu, sử dụng phép đo dòng chảy để phân biệt CTC với bạch cầu dựa trên tỷ lệ và kích thước hạt nhân trên tế bào chất cao hơn.Hiện tại, xét nghiệm duy nhất được FDA chấp thuận để phát hiện CTC là hệ thống Cell-Search ™, sử dụng chất đánh dấu bề mặt tế bào EpCAM. Tuy nhiên, phát hiện CTC dựa trên dấu hiệu kết hợp có thể làm tăng tỷ lệ dương tính.54 Hỗn hợp các kháng thể chống lại ASGPR và CPS1 đã đạt được tỷ lệ phát hiện CTC là 91% ở bệnh nhân HCC.63 Zhang và cộng sự đã sử dụng CTC-Chip với các kháng thể chống lại ASGPR, P -CK và CPS1, và phân biệt bệnh nhân HCC với những người bị bệnh gan lành tính hoặc ung thư không phải ung thư HCC với tỷ lệ 100% .64 Một nghiên cứu của Wang đã phát hiện EpCAM + CTCs ở 60% trong số 42 bệnh nhân HCC và tìm thấy mối tương quan đáng kể giữa cả hai mặt tích cực tỷ lệ và số lượng CTC có giai đoạn TNM.65 Guo và cộng sự nhận thấy rằng điểm PCR có nguồn gốc từ CTC tăng lên ở 125/171 (73%) bệnh nhân có mức AFP <20 ng / mL với độ nhạy 72,5% và a độ đặc hiệu là 95,0%, so với 57,0% và 90,0% đối với AFP ở ngưỡng giới hạn 20 ng / mL.66 Sự kết hợp của AFP và CTC có thể cải thiện việc phát hiện HCC.45 Người ta tin rằng CTC có lợi thế hơn AFP trong việc sàng lọc sớm các nhóm có nguy cơ cao mắc HCC. Tuy nhiên, phát hiện CTC dựa trên dấu hiệu kết hợp có thể làm tăng tỷ lệ dương tính.54 Hỗn hợp các kháng thể chống lại ASGPR và CPS1 đã đạt được tỷ lệ phát hiện CTC là 91% ở bệnh nhân HCC.63 Zhang và cộng sự đã sử dụng CTC-Chip với các kháng thể chống lại ASGPR, P -CK và CPS1, và phân biệt bệnh nhân HCC với những người bị bệnh gan lành tính hoặc ung thư không phải ung thư HCC với tỷ lệ 100% .64 Một nghiên cứu của Wang đã phát hiện EpCAM + CTCs ở 60% trong số 42 bệnh nhân HCC và tìm thấy mối tương quan đáng kể giữa cả hai mặt tích cực tỷ lệ và số lượng CTC có giai đoạn TNM.65 Guo và cộng sự nhận thấy rằng điểm PCR có nguồn gốc từ CTC tăng lên ở 125/171 (73%) bệnh nhân có mức AFP <20 ng / mL với độ nhạy 72,5% và a độ đặc hiệu là 95,0%, so với 57,0% và 90,0% đối với AFP ở ngưỡng giới hạn 20 ng / mL.66 Sự kết hợp của AFP và CTC có thể cải thiện việc phát hiện HCC.45 Người ta tin rằng CTC có lợi thế hơn AFP trong việc sàng lọc sớm các nhóm có nguy cơ cao đối với HCC.Tuy nhiên, việc phát hiện kết hợp các CTC dựa trên marker có thể làm tăng tỷ lệ phần trăm kết quả dương tính.54 Hỗn hợp các kháng thể kháng ASGPR và CPS1 đạt được tỷ lệ phát hiện CTC là 91% ở bệnh nhân HCC.63 Zhang et al.đã sử dụng CTC-Chip với các kháng thể chống lại ASGPR, P-CK và CPS1, đồng thời phân biệt bệnh nhân mắc ung thư biểu mô tế bào gan với bệnh nhân bị bệnh gan lành tính hoặc không mắc bệnh ung thư biểu mô tế bào gan với tỷ lệ 100%.частота и количество ЦОК со стадией TNM.65 Guo и соавторы обнаружили, что показатель ПЦР, полученный из ЦОК, был повышен у 125/171 (73%) пациентов, у которых уровень АФП был <20 нг/мл с чувствительностью 72,5% и специфичность 95,0% по сравнению с 57,0% и 90,0% для АФП при пороговом уровне 20 нг/мл.66 Комбинация АФП и ЦОК может улучшить обнаружение ГЦК.45 Считается, что ЦОК имеют преимущество перед АФП при раннем скрининге групп. tần suất và số lượng CTC có giai đoạn TNM.65 Guo và cộng sự nhận thấy rằng PCR có nguồn gốc từ CTC tăng cao ở 125/171 (73%) bệnh nhân có nồng độ AFP <20 ng / mL với độ nhạy 72,5% và độ đặc hiệu là 95,0% so với 57,0% và 90,0% đối với AFP ở ngưỡng giới hạn 20 ng / mL.66 Sự kết hợp của AFP và CTC có thể cải thiện việc phát hiện HCC. 45 CTC được coi là có lợi thế hơn AFP trong việc sàng lọc sớm các nhóm.với nguy cơ cao mắc ung thư biểu mô tế bào gan.Tuy nhiên, việc phát hiện CTC kết hợp dựa trên dấu hiệu có thể làm tăng tỷ lệ phần trăm kết quả dương tính.54 Hỗn hợp kháng thể kháng ASGPR và CPS1 đạt được tỷ lệ phát hiện CTC 91% ở bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan.63 Zhang và cộng sự.đã sử dụng chip CTC có kháng thể chống lại ASGPR, P-CK và CPS1 và phân biệt bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan lành tính và không ung thư biểu mô tế bào gan với tỷ lệ 100%.Nghiên cứu của 64 Wang đã xác định được 60% EpCAM + CTC ở 42 bệnh nhân HCC và tìm thấy mối tương quan đáng kể giữa tỷ lệ mắc và số lượng CTC ở giai đoạn TNM. 65 Guo 等 人 发现 ， 在 AFP 水平 <20 ng / mL 的 125/171 (73%) 名 患者 中 ， CTC 衍生 的 PCR 评分 升高 ， 敏感性 为 72.5% ， 特异性 为 95.0% ， 而 AFP 在 截止值为 20 ng / mL 时 的 特异性 为 57.0% 和 90.0%。 65 Guo 等 人 发现 在 在 在 水平 <20 ng / ml 的 125/171 (73%) 名 患者 ， ， ctc 衍生 pcr 评分 ， 敏感性 为 为 72,5% ， 为 95,0% ， AFP 在 截止 截止 截止 截止 截止 截止截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 值为 20ng / mL 时 的 特异性 为 57.0% 和 90.0%。65 Guo và cộng sự.обнаружили, что у 125/171 (73%) пациентов с уровнем АФП <20 нг/мл показатели ПЦР, полученные с помощью ЦОК, были повышены с чувствительностью 72,5% и специфичностью 95,0%, в то время как АФП на уровне отсечки Специфичность составляла 20 нг / мл. phát hiện ra rằng ở 125/171 (73%) bệnh nhân có nồng độ AFP <20 ng / mL, giá trị PCR có nguồn gốc từ CTC được tăng lên với độ nhạy 72,5% và độ đặc hiệu là 95,0%, trong khi AFP ở độ đặc hiệu giới hạn. là 20 ng / mL.ml là 57,0% và 90,0%.66 Sự kết hợp giữa ORP và CTC cải thiện việc phát hiện HCC.45 CTC được cho là vượt trội hơn AFP trong việc sàng lọc sớm các quần thể ung thư biểu mô tế bào gan có nguy cơ cao.Vì vậy, đối với các nhóm ung thư biểu mô tế bào CTC dương tính và nguy cơ cao, xét nghiệm CTC thường quy nên kết hợp với siêu âm và phát hiện AFP.Tuy nhiên, CTC được coi là yếu tố dự báo quan trọng về sự di căn và tái phát của khối u, và việc phát hiện CTC không được khuyến cáo một cách độc lập như một công cụ chẩn đoán.62 Do đó, CTC có thể đóng vai trò như một dấu ấn sinh học dự đoán tốt hơn so với các dấu ấn hiện đang được sử dụng khác. Zhou và cộng sự nhận thấy rằng những bệnh nhân có số lượng EpCAM + CTC và tế bào T điều hòa tăng cao có nguy cơ tái phát ung thư biểu mô tế bào gan cao hơn những người có số lượng CTCs thấp, với tỷ lệ tái phát là 66,7% so với 10,3% (P <0,001) .67 Một nghiên cứu tương tự đã được báo cáo bởi Zhong và cộng sự. Ngoài ra, Qi phát hiện ra rằng 101 trong số 112 bệnh nhân (90,81%) mắc HCC, bao gồm cả những người mắc bệnh giai đoạn đầu, dương tính với CTC và các nốt HCC rất nhỏ được phát hiện sau 3 đến 5 tháng theo dõi. Zhou và cộng sự nhận thấy rằng những bệnh nhân có số lượng EpCAM + CTC và tế bào T điều hòa tăng cao cho thấy nguy cơ tái phát HCC cao hơn những người có số lượng CTC thấp, với tỷ lệ tái phát là 66,7% so với 10,3% (P <0,001) .67 A Nghiên cứu tương tự đã được báo cáo bởi Zhong và cộng sự. Ngoài ra, Qi phát hiện ra rằng 101 trong số 112 bệnh nhân (90,81%) mắc HCC, bao gồm cả những người mắc bệnh ở giai đoạn đầu, dương tính với CTC và các nốt HCC rất nhỏ được phát hiện sau 3 đến 5 tháng theo dõi. Чжоу и др.обнаружили, что у пациентов с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток риск развития рецидива ГЦК был выше, чем у пациентов с низким количеством ЦОК, с коэффициентом рецидивов 66,7% против 10,3% (P <0,001)67. Zhou và cộng sự nhận thấy rằng những bệnh nhân có EpCAM + CTC cao và tế bào T điều hòa có nguy cơ tái phát HCC cao hơn những người có CTC thấp, với tỷ lệ tái phát là 66,7% so với 10,3% (P <0,001) 67.Một nghiên cứu tương tự đã được thực hiện bởi Zhong và cộng sự.68. Ngoài ra, Qi phát hiện ra rằng 101 trong số 112 bệnh nhân (90,81%) mắc ung thư biểu mô tế bào gan, bao gồm cả những người mắc bệnh sớm, có CTCs và các nốt HCC rất nhỏ được phát hiện sau 3 đến 5 tháng theo dõi. Zhou 等 人 发现 ， 与 CTC 数量 较少 的 患者 相比 ， EpCAM + CTC 和 调节 性 T 细胞 数量 升高 的 发生 HCC 复发 的 风险 更高 ， 复发 率 分别 66,7% 和 10,3% (P <0,001)。 Chu 等 人 发现 与 与 ctc 数量 少 的 患者 相比 ， epcam + ctc 和 t 细胞 数量 的 患者 发生 hcc 复发 风险 更 ， 复发 率 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 数量 的 10,3% ( p <0,001) 。。。。。。。。。。。。。。。 Чжоу и др.обнаружили, что пациенты с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток имели более высокий риск рецидива ГЦК по сравнению с пациентами с меньшим количеством ЦОК, с частотой рецидивов 66,7% и 10,3% соответственно (P <0,001). Zhou và cộng sự.nhận thấy rằng những bệnh nhân có EpCAM + CTC cao và tế bào T điều hòa có nguy cơ tái phát ung thư biểu mô tế bào gan cao hơn so với những bệnh nhân có ít CTC, với tỷ lệ tái phát lần lượt là 66,7% và 10,3% (P <0,001).Một nghiên cứu tương tự đã được báo cáo bởi Zhong và cộng sự.68 Ngoài ra, Qi nhận thấy 101 trong số 112 bệnh nhân HCC (90,81%), bao gồm cả những bệnh nhân mắc bệnh ở giai đoạn đầu, có kết quả CTC dương tính và phát hiện thấy các nốt HCC rất nhỏ sau 3 lần khám.Thời gian quan sát lên đến 5 tháng.Họ cũng tìm thấy CTC ở 12 bệnh nhân nhiễm HBV mãn tính và tìm thấy khối u HCC nhỏ trong vòng 5 tháng ở 2 bệnh nhân dương tính với CTC.69 Do đó, CTC có thể được sử dụng để dự đoán HCC, 70 nhưng chúng có thể được sử dụng thường xuyên hơn như các dấu ấn sinh học dự đoán.
Giống như cfDNA, cfRNA được giải phóng vào máu thông qua nhiều hệ thống khác nhau.Các phân tử này trong máu ngoại vi đại diện cho nguồn gốc mô ung thư.So với các dấu hiệu được phát hiện bằng các phương pháp không xâm lấn, cfRNA được điều chỉnh linh hoạt hơn, đặc hiệu cho mô và có nhiều trong môi trường ngoại bào.Ý nghĩa và giá trị chẩn đoán của 71 miRNA (miRNA) trong HCC đã được báo cáo trong nhiều nghiên cứu.miRNA là RNA không mã hóa nội sinh (ncRNA) điều chỉnh các hoạt động sinh học phân tử khác nhau bằng cách ức chế sự dịch mã của RNA thông tin đích (mRNA).miRNA nằm trong các cơ quan apoptotic được bao bọc trong exsome, nhưng chúng cũng có thể liên kết ổn định với protein huyết thanh và lipid trong máu ngoại vi và có thể được sử dụng để đánh giá HCC.microRNA có liên quan đến quá trình tái tạo gan, chuyển hóa lipid, quá trình apoptosis, viêm và sự phát triển của HCC.72 miRNA gây ung thư như miR-21, miR-155 và miR-221 được biết đến nhiều trong HCC.Đặc biệt, miR-21 đóng vai trò chủ chốt trong quá trình tổng hợp collagen ở chất nền ngoại bào và xơ hóa và thúc đẩy quá trình hình thành ung thư gan bằng cách kích hoạt các tế bào gốc tạo máu.72,73 Các miRNA ức chế khối u trong HCC bao gồm miRNA-122, miRNA-29, họ Let-7 và họ miRNA-15.Họ Let-7 bao gồm nhiều miRNA ức chế khối u nhắm vào họ RAS.Họ miR-15 bao gồm miR-15a, miR-15b, miR-16, miR-195 và miR-497, có trình tự bổ sung cho một số mRNA.Ngoài ra, các RNA dài không mã hóa (lncRNA) và RNA tròn (CirRNA) cũng rất quan trọng để sàng lọc sớm HCC.lncRNA đại diện cho lớp ncRNA rộng nhất, bao gồm các ncRNA giống mRNA và có liên quan đến cơ chế bệnh sinh của nhiều bệnh ở người.LncRNA đóng một vai trò điều hòa trong vi môi trường gan và bệnh gan mãn tính.74 CircRNA cũng là một lớp ncRNA với nhiều chức năng trong việc điều hòa biểu hiện gen.Gần đây, vòng sinh học đã được coi là công cụ chẩn đoán HCC.
RNA tự do lưu hành có độ ổn định đáng kể, bao gồm khả năng chống lại nhiệt độ, pH và RNase, điều này làm cho việc phân lập fnRNA từ máu ngoại vi ít tẻ nhạt hơn khi sử dụng các phương pháp tinh sạch RNA tiêu chuẩn.Các phương pháp được sử dụng phổ biến nhất bao gồm NGS, microarray và RT-qPCR.NGS cho phép đo các microRNA trong toàn bộ bộ gen.Tuy nhiên, phương pháp này tốn kém và phân tích không được chuẩn hóa.Ngược lại, RT-qPCR không tốn kém, nhanh chóng khuếch đại axit nucleic và mang lại nhiều lợi thế như độ nhạy cao hơn, độ chính xác cao hơn, dải động rộng hơn và yêu cầu ít mẫu hơn.Microarrays là một phương pháp khác được sử dụng để phát hiện miRNA dựa trên sự lai nhạy cảm và đặc hiệu của các miRNA đích với các đầu dò DNA bổ sung, 75 nhưng việc phân tích dữ liệu microarray tốn nhiều thời gian.
MiR-122 và Let-7 lưu hành đã được báo cáo là có khả năng hữu ích trong việc chẩn đoán ung thư biểu mô tế bào gan giai đoạn sớm ở các nhóm nguy cơ cao, dấu hiệu đánh dấu ở bệnh nhân có nốt tiền ác tính liên quan đến HBV và ung thư biểu mô tế bào gan giai đoạn sớm.76 Cai và cộng sự.nhận thấy rằng các thành viên của gia đình Let-7 (miR-92, miR-122, miR-125b, miR-143, miR-192, miR-16, miR-126 và miR-199a / b) có nguy cơ mắc bệnh mãn tính HCC ở bệnh nhân viêm gan.Họ Let-7 có thể đóng vai trò như một dấu ấn sinh học thay thế hiệu quả để dự đoán sự phát triển của HCC ở các nhóm nguy cơ cao liên quan đến viêm gan C. 77 miR-122 có độ chính xác chẩn đoán cao trong việc phát hiện sớm HCC ở bệnh nhân xơ gan.78 MiR-107 lưu hành trong huyết thanh cũng đã được đánh giá trong giai đoạn đầu của HCC, 79 và cho thấy tiềm năng tốt ở những quần thể có nguy cơ cao.Zhou và cộng sự đã báo cáo rằng một bảng các miRNA (miR-122, miR-192, miR-21, miR-223, miR-26a, miR-27a và miR-801) có thể phân biệt HCC với viêm gan B mãn tính (CHB) và xơ gan độ nhạy lần lượt là 79,1% và 75% và độ đặc hiệu là 76,4% và 91,1%.80 Ở bệnh nhân HCC liên quan đến HBV, chúng tôi thấy rằng mức miR150 giảm đáng kể so với ở bệnh nhân HBV mạn tính không có HCC (độ nhạy 79,1%, độ đặc hiệu 76,5%).-224 tăng ở HCC so với nhóm chứng khỏe mạnh, và các phân tích phân nhóm cho thấy mức cao hơn ở bệnh nhân HCC liên quan đến HBV.Bệnh nhân xơ gan và HCC liên quan đến viêm gan B đã xác định một bộ phân loại siRNA chứa bảy siRNA biểu hiện khác biệt có thể phát hiện HCC trong các đối chứng khác nhau;Phạm vi AUC khi sàng lọc sớm tốt hơn các tình nguyện viên AFP.Họ phát hiện ra rằng bốn miRNA (miR-1972, miR-193a-5p, miR-214-3p và miR-365a-3p) có thể phân biệt bệnh nhân mắc ung thư biểu mô tế bào gan với bệnh nhân không bị ung thư biểu mô tế bào gan.Năm miRNA biểu hiện quá mức (miR-122-5p, miR-125b-5p, miR-885-5p, miR-100-5p và miR-148a-3p) được coi là nhiễm trùng HBV tiềm ẩn trong ung thư biểu mô tế bào gan, xơ gan và dấu ấn sinh học CHB, đặc biệt miR-34a-5p có thể là dấu ấn sinh học cho bệnh xơ gan, 85 và có thể là dấu ấn sinh học tiềm năng để sàng lọc sớm HCC ở những người có nguy cơ cao.LncRNA được nghiên cứu nhiều nhất trong HCC được kích hoạt cao trong ung thư gan (HULC).Các nghiên cứu khác đã chỉ ra rằng HULC lưu hành ở bệnh nhân HCC có thể được sử dụng như một dấu hiệu chẩn đoán vì lncRNA này được điều chỉnh cao ở bệnh nhân HCC so với người khỏe mạnh.71,86 Trong số các lnRNA khác, LINC00152 được coi là lncRNA chẩn đoán tốt nhất do AUC, độ nhạy và độ đặc hiệu cao.86 Trong một nghiên cứu, biểu hiện máu ngoại vi của LINC00152 tăng dần từ nhóm chứng khỏe mạnh bình thường đến bệnh nhân CHB và xơ gan, và cuối cùng là cao nhất ở HCC.Các nghiên cứu về sự biểu hiện của CirSMARCA5 trong huyết tương của bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan đã cho thấy sự suy giảm tiến triển trong biểu hiện ở bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan, từ viêm gan đến xơ gan và các tổn thương tiền ung thư.87 Phân tích các đường cong ROC đã xác nhận tiềm năng của các vòng sinh học này trong việc phân biệt bệnh nhân viêm gan hoặc xơ gan với bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan, đặc biệt là những người có mức AFP dưới 200 ng / mL.Ngoài ra, Zhu đã phân tích 13.617 RNA chu kỳ trong mẫu huyết tương của bệnh nhân HCC liên quan đến HBV và xác nhận rằng 6 RNA chu kỳ được biểu hiện khác nhau ở bệnh xơ gan do HCC và HBV, cho thấy rằng cRNA có thể có lợi.chỉ điểm để tầm soát sớm các nhóm nguy cơ cao như bệnh nhân gan mật, bệnh nhân xơ cứng.88
Exosomes là những túi màng có đường kính 40–160 nm;nhiều túi nội bào hợp nhất với màng tế bào và được giải phóng ra chất nền ngoại bào.Chúng chứa nhiều thành phần tích cực, bao gồm lipid, protein, RNA và DNA, và đóng một vai trò quan trọng trong giao tiếp giữa các tế bào, cả tế bào HCC và không HCC.89,90 Exosomes điều chỉnh sự tiến triển của HCC bằng cách kích hoạt nguyên bào sợi tế bào gan và tế bào hình sao, tế bào miễn dịch, tế bào gan bình thường và tế bào HCC.91 Trong vi môi trường khối u, các tế bào khối u tạo ra một số lượng lớn các exsome được chuyển từ các tế bào ung thư đến các tế bào chưa trưởng thành, do đó chúng tham gia vào quá trình sinh ung thư, suy thoái và tín hiệu tế bào.92 Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng exosomes có thể chuyển ung thư sang tế bào bình thường trong quá trình bệnh lý, đây có thể là một trong những cơ chế của sự xâm lấn và di căn của khối u.93 Vai trò của exosomes trong sự tiến triển của ung thư có thể năng động và cụ thể đối với loại ung thư, 89 Exomes có thể được nội tại bởi các tế bào lân cận hoặc xa để điều chỉnh nhiều gen mục tiêu trong tế bào nhận, chúng có thể tham gia vào các ion truyền thông gian bào và tương tác vi môi trường tế bào, chúng có thể làm trung gian truyền tín hiệu và chuyển hóa tế bào.94 Đặc điểm và sự thay đổi động của các phân tử hàng hóa ngoài phản ánh trực tiếp các đặc điểm và sự thay đổi động của các tế bào khối u ở cha mẹ, 95 cũng là cơ sở cho việc sử dụng các exosomes trong chẩn đoán và tiên lượng ung thư, cũng như để dự đoán phản ứng của từng cá nhân với liệu pháp chống ung thư ..96
Các phương pháp phòng thí nghiệm truyền thống để phân lập và phân tích exosomes rất phức tạp, nhiều bước và tốn thời gian, bao gồm siêu ly tâm, lọc, sắc ký loại trừ kích thước, tinh sạch ái lực miễn dịch, Western blotting, xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym (ELISA), PCR và phân tích dòng chảy.các hệ thống thu nhỏ và nền tảng lab-on-a-chip sử dụng công nghệ vi mô / nano đang được phát triển rộng rãi để phân lập exosomes nhanh chóng, thuận tiện tại chỗ.Phân tích theo dõi hạt nano (NTA) là một phương pháp được sử dụng rộng rãi để xác định kích thước và nồng độ của exomes, bao gồm các phương pháp như hạt nano từ tính và polyhydroxyalkanoat.Các phương pháp vi lỏng và điện hóa cũng có thể nhanh chóng phát hiện các exomes ở sản lượng cao.
Protein exosomal là dấu hiệu quan trọng để chẩn đoán ung thư biểu mô tế bào gan.Trong nghiên cứu Arbelaiz, mức độ 98 RasGAP SH3 protein liên kết (G3BP) và thụ thể polyme immunoglobulin (PIGR) đã tăng lên đáng kể trong các exsome có nguồn gốc từ HCC, và hiệu quả kết hợp giả định của hai protein này cao hơn so với AFP.Quá tải sắt là một yếu tố quan trọng góp phần vào sự phát triển của HCC.Tseng báo cáo rằng hepcidin có thể đóng một vai trò quan trọng trong việc kháng HCC.99 Exposome có nguồn gốc từ huyết thanh của bệnh nhân HCC có số lượng bản sao của biến thể mRNA hepcidin cao hơn đáng kể so với các biến thể khỏe mạnh của họ, cho thấy rằng hepcidin có thể là một dấu ấn sinh học chẩn đoán mới cho HCC.Protein 14-3-3ζ trong exsome do 100 HCC tạo ra có thể làm giảm sự hoạt hóa, tăng sinh và biệt hóa của tế bào T và có thể gây ra sự biến đổi tế bào T thành tế bào T điều hòa, dẫn đến suy giảm tế bào T.101 Điều này được hỗ trợ bởi một số nghiên cứu điều tra sự trốn tránh của khối u khỏi giám sát miễn dịch, 102 có thể góp phần vào sự hình thành khối u HCC.
Ngoài sự hiện diện của ecRNA trong huyết tương hoặc huyết thanh, các exosomes làm giàu RNA có thể được sử dụng để phân giai đoạn thời gian thực không xâm lấn trong việc tầm soát khối u sớm và để xác định sự phát triển của khối u và đáp ứng với điều trị.Mức độ miRNA-21 exosomal trong huyết thanh ở nhóm HCC cao hơn 2,21 lần so với nhóm CHB và ở nhóm HCC cao hơn 5,57 lần so với nhóm khỏe mạnh.Trong nghiên cứu Wang, exosomes làm tăng đáng kể HCC so với bệnh nhân xơ gan với giá trị AUC là 0,83 (KTC 95% 0,74–0,93) và 0,94 (KTC 95% 0,88–1,00).104 Dữ liệu thu được đã làm sáng tỏ sự tham gia của các phân tử hàng hóa exosomal cụ thể trong việc điều chỉnh sự phát sinh ung thư và sự tiến triển của HCC.105 Biểu hiện huyết thanh của miR-221, miR-103, miR-181c, miR-181a, miR-93 và miR-26a là nhất quán.và di căn, và mức miR21 ở bệnh nhân HCC cao hơn nhiều so với nhóm chứng khỏe mạnh và cả ở bệnh nhân CHB.102 LncRNA có giá trị chẩn đoán tiềm năng trong ung thư biểu mô tế bào gan.Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng các exosomes có nguồn gốc từ huyết thanh của bệnh nhân HCC có mức độ LINC00161, LINC000635 và lncRNA được kích hoạt bằng cách chuyển đổi yếu tố tăng trưởng-β cao hơn đáng kể so với những bệnh nhân không có HCC, và các lncRNA này có liên quan chặt chẽ với giai đoạn TNM và thể tích khối u.110 Conigliaro và cộng sự.Các exosomes CD90 + được phát hiện biểu hiện mức độ cao của lncRNAH19, làm tăng đáng kể sự giải phóng yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu (VEGF) và sản xuất thụ thể VEGF-R1, do đó kích thích hình thành mạch.93 CircRNA là một loại ncRNA khác ở ngoại bào - được biểu hiện ở mức thấp hơn nhưng ổn định giữa các loài, các vòng tròn cũng thể hiện tính đặc hiệu cho loại tế bào, loại mô, giai đoạn phát triển và hoạt động điều hòa.111 vòng sinh học là dấu ấn sinh học chẩn đoán ung thư sớm và xâm lấn tối thiểu.112 Các thử nghiệm lâm sàng gần đây đã chỉ ra rằng độ đặc hiệu của từng miRNA trong việc dự đoán ung thư biểu mô tế bào gan không phải là lý tưởng.Do đó, phát hiện phức tạp bằng cách sử dụng nhiều xét nghiệm (ví dụ, miR-122 và miR-48a kết hợp với AFP) có thể cải thiện việc xác định HCC sớm và phân biệt HCC với xơ gan.100
Bệnh nhân CHB và xơ gan là nhóm nguy cơ cao phát triển ung thư biểu mô tế bào gan phổ biến nhất.Đối với các nhóm nguy cơ cao, khi đã đạt được đáp ứng virus học bền vững, cần xây dựng một chiến lược giám sát hiệu quả về chi phí dựa trên nguy cơ HCC và tầm soát sớm là chìa khóa để cải thiện chẩn đoán và điều trị HCC với tỷ lệ hiệu quả chi phí cao2 ..Các phương pháp tầm soát ung thư sớm có nhiều hạn chế: các phương pháp tầm soát sớm hiệu quả chưa được phát triển cho hầu hết các loại ung thư và việc tuân thủ điều trị thường thấp.So với các phương pháp sàng lọc sớm truyền thống, công nghệ sinh thiết lỏng có những ưu điểm rõ ràng: dễ lấy mẫu, phát hiện panrac, khả năng tái tạo mẫu tốt và đáp ứng hiệu quả với sự không đồng nhất của khối u.Do tính hiệu quả về chi phí của các phương pháp liên quan đến sinh thiết lỏng, việc sử dụng chúng trong sàng lọc HCC chưa được thử nghiệm thường xuyên.Mặc dù có những tiến bộ trong phát hiện chính xác ở cấp độ phân tử, sinh thiết chất lỏng rất tốn kém để phát hiện HCC ở bệnh nhân đích, hạn chế việc sử dụng rộng rãi so với các thủ thuật hình ảnh cụ thể như siêu âm và chụp cộng hưởng từ.113.114 Tuy nhiên, một nghiên cứu trước đây cho thấy sinh thiết lỏng cho thấy lợi ích đáng kể về số năm sống được điều chỉnh chất lượng (QALYs).115 Lợi ích của sinh thiết lỏng trong ung thư biểu mô sớm của dạ dày và vòm họng cũng đã được chứng minh.116,117 Quan điểm hiện tại cho rằng sinh thiết lỏng có thể bổ sung cho các dấu ấn sinh học huyết thanh và sàng lọc X quang trong việc phát hiện và chẩn đoán khối u.117 118
Theo các tài liệu hiện nay, công nghệ sinh thiết chất lỏng đã cho thấy độ nhạy và độ đặc hiệu cao hơn đáng kể trong việc tầm soát sớm các nhóm nguy cơ cao bị ung thư gan.Bất kể loại sinh thiết chất lỏng nào, nó có thể phân biệt HCC với những người có nguy cơ cao không có HCC, cho thấy tầm quan trọng của việc sàng lọc sớm vì sự khác biệt giữa những người có nguy cơ cao và khỏe mạnh là rõ ràng.ctDNA có thời gian bán hủy ngắn và có thể được sử dụng để phát hiện HCC, vì vậy bất kỳ thay đổi nào trong cDNA có nguồn gốc từ khối u đều có thể cung cấp bằng chứng cụ thể theo thời gian thực về sự tiến triển của khối u, đặc biệt là đối với các khối u nhỏ.Mức độ ctDNA cao cho thấy sự phát triển và lây lan của ung thư và là dấu hiệu sớm của sự tiến triển và tái phát.Ngoài ra, dựa trên kết quả của ctDNA, bệnh nhân có thể được điều trị và theo dõi từng cá nhân.119 Các vị trí methyl hóa cụ thể có thể là dấu hiệu tốt hơn AFP để xác định sớm ung thư biểu mô tế bào gan và các nốt xơ gan.Trong các trường hợp ung thư biểu mô tế bào gan có thể cắt lại, mức độ cDNA cao là dấu hiệu của sự xâm lấn vi mạch và tái phát và di căn sau phẫu thuật.Những thay đổi về số lượng bản sao có liên quan đến sự sống còn của bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan.Có thể giả định rằng việc đánh giá cDNA có thể tham gia vào quá trình điều trị tổng thể HCC, và cDNA có thể đóng vai trò là một chỉ số hiệu quả của việc điều biến điều trị.Các chất đánh dấu dựa trên các đột biến di truyền cụ thể trong ctDNA đã được hướng dẫn lâm sàng áp dụng để dự đoán hiệu quả và theo dõi tình trạng kháng thuốc.Xét nghiệm ctDNA có thể là công cụ sinh thiết lỏng hữu ích nhất để sàng lọc sớm.CTCs cũng đóng một vai trò quan trọng trong việc sàng lọc sớm các nhóm ung thư biểu mô tế bào gan có nguy cơ cao.Các dấu hiệu khác nhau của các CTC liên quan đến HCC có tầm quan trọng đặc biệt trong việc khởi phát, phát triển và tái phát của HCC.Là các túi màng, các exosomes tham gia vào quá trình giao tiếp giữa các tế bào, đặc biệt là trong các tế bào HCC.Các microRNA lưu hành ổn định trong máu và do đó có thể hữu ích hơn trong việc sàng lọc sớm HCC.Dần dần, các protein exosomal và exosomes giàu RNA đã được phát hiện, và hiệu quả dự đoán của chúng đối với HCC đã được xác nhận.Điều thú vị là các căn nguyên khác nhau của HCC cũng có thể liên quan đến các đột biến khác nhau, vì vậy chúng ta có thể chọn các dấu ấn sinh học khác nhau để sàng lọc sớm dựa trên các căn nguyên khác nhau của HCC.120
Tuy nhiên, các kỹ thuật sinh thiết chất lỏng hiện nay còn nhiều nghi vấn về tính ổn định và không thể thực hiện sàng lọc hoặc theo dõi sớm ung thư biểu mô tế bào gan một cách độc lập, nhưng vẫn có thể bổ sung cho việc sàng lọc và chẩn đoán riêng lẻ.121 Là một dạng sinh thiết lỏng, việc phát hiện và hình ảnh ctDNA, CTC, cfRNA và AFP hoặc PIVKA-II liên kết với exosome có những ứng dụng đầy hứa hẹn trong chẩn đoán sớm và tiên lượng ung thư biểu mô tế bào gan.Tuy nhiên, cơ chế chính xác của việc phóng thích ctDNA vào máu vẫn chưa được làm sáng tỏ.Tiết lộ các đặc tính sinh học cơ bản của ctDNA có thể tạo điều kiện thuận lợi cho việc sử dụng nó như một chất đánh dấu.Số lượng nhỏ ctDNA trong lưu thông và các yêu cầu xử lý mẫu nghiêm ngặt là những thách thức đối với việc triển khai lâm sàng phát hiện cDNA trong HCC.Ngoài ra, đột biến gen không có các tính năng cụ thể cho phép xác định chính xác các chất gây ung thư.Vì nhiều biến thể di truyền và soma cũng có trong các mô bình thường, các đột biến di truyền được xác định bằng sinh thiết chất lỏng có thể hữu ích hạn chế trong việc sàng lọc sớm ung thư biểu mô tế bào gan.122 Những hạn chế của các mục tiêu gen hữu ích được xác định rõ ràng và các dấu ấn sinh học giúp phân biệt cDNA với DNA không phải khối u là những vấn đề quan trọng nhất trong việc sử dụng cDNA.thiếu tính hữu ích của các dấu hiệu nhạy cảm và cụ thể để phát hiện các CTC.Chỉ tìm thấy các tế bào sống sót có tiềm năng di căn và sự kết hợp tối ưu của các chất đánh dấu được làm giàu CSC là không rõ ràng.Việc phân lập các CTC để nuôi cấy và đánh giá các cấu hình đột biến của chúng cũng là một nhiệm vụ đầy thách thức.Do các vấn đề trong việc xác định, phân lập và tinh chế exosomes, cơ chế phân tử cụ thể vẫn chưa rõ ràng, và các nghiên cứu trước đây về cơ chế của exosomes và HCC chưa được đi sâu, cũng như cách thức các miRNA, lncRNA và protein được sắp xếp vào exosomes. , và không rõ liệu sự hấp thụ exosome có phải là một quá trình kiểu cụ thể hay không.Việc sử dụng exosomes để chẩn đoán và điều trị ung thư biểu mô tế bào gan vẫn còn ở giai đoạn tiền lâm sàng.Việc thiếu tiêu chuẩn hóa các quy trình sinh thiết lỏng, chẳng hạn như loại ống được sử dụng để lấy máu, thể tích máu, lưu trữ và phát hiện mẫu, phân lập và làm giàu, có thể ngăn cản việc sử dụng chúng trong thực hành lâm sàng thông thường do sự khác biệt trong thực hành giữa các trung tâm y tế.Hiệu quả của sinh thiết lỏng trong sàng lọc sớm, chẩn đoán, đánh giá hiệu quả và dự đoán ung thư biểu mô tế bào gan vẫn còn được khám phá, đặc biệt là đối với các nhóm nguy cơ cao.Công nghệ sinh thiết lỏng có tiềm năng rất lớn và dự kiến sẽ được sử dụng rộng rãi trong thực hành lâm sàng ung thư gan trong tương lai gần.
1. Sung H., Furley J., Siegel RL và cộng sự.Thống kê Ung thư Toàn cầu 2020: GLOBOCAN ước tính tỷ lệ mắc và tử vong do 36 loại ung thư ở 185 quốc gia.CA Ung thư J Clin.Năm 2021; 71 (3): 209-249.doi: 10.3322 / caac.21660
2. Trụ sở của Ủy ban Y tế Quốc gia.Tiêu chuẩn chẩn đoán và điều trị ung thư gan nguyên phát (ấn bản 2022) [J].Tạp chí Bệnh gan lâm sàng, 2022, 38 (2): 288-303.doi: 10.3969 / j.issn.1001-5256.2022.02.009
3. Zhou J, Sun H, Wang Z, et al.Hướng dẫn chẩn đoán và điều trị ung thư biểu mô tế bào gan (ấn bản 2019).Ung thư gan.Năm 2020; 9 (6): 682-720.doi: 10.1159 / 000509424
4. Kokudo N, Takemura N, Hasegawa K, et al.Hướng dẫn thực hành lâm sàng cho ung thư biểu mô tế bào gan: Hiệp hội Bệnh gan Nhật Bản, 2017 (Hướng dẫn thứ 4 của JSH-HCC), bản cập nhật năm 2019.Hồ chứa bệnh gan.2019; 49 (10): 1109–1113.doi: 10.1111 / hepr.13411
5. Barrera-Saldana HA, Fernandez-Garza LE, Barrera-Barrera SA Sinh thiết lỏng trong bệnh gan mãn tính.Ann Hepato.Năm 2021; 20: 100197.doi: 10.1016 / j.aohep.2020.03.008
6. Tai TKYu., Tan P.Kh.Sinh thiết ung thư vú dạng lỏng: một đánh giá tập trung.Phòng thí nghiệm Arch Pathol Med.Năm 2021; 145 (6): 678–686.doi: 10.5858 / arpa.2019-0559-RA
7. Kanval F., Singal AG Giám sát ung thư biểu mô tế bào gan: thực hành tốt nhất hiện tại và hướng tương lai.Khoa tiêu hóa.2019; 157 (1): 54-64.doi: 10.1053 / j.gastro.2019.02.049
8. Hiệp hội Nghiên cứu Châu Âu L, Tổ chức Châu Âu R, C Therapeutics.Hướng dẫn lâm sàng EASL-EORTC: điều trị ung thư biểu mô tế bào gan.J Heparin.2012; 56 (4): 908–943.doi: 10.1016 / j.jhep.2011.12.001
9. Zhang G., Ha SA, Kim HK và cộng sự.Phân tích kết hợp AFP và HCCR-1 như các dấu hiệu huyết thanh học hữu ích trong ung thư biểu mô tế bào gan nhỏ: một nghiên cứu thuần tập tiền cứu.Bỏ đánh dấu.2012; 32 (4): 265–271.doi: 10.3233 / DMA-2011-0878
10. Chen S, Chen H, Gao S, et al.Sự biểu hiện khác biệt của microRNA-125b huyết tương trong bệnh gan do vi rút viêm gan B và khả năng chẩn đoán ung thư biểu mô tế bào gan do vi rút viêm gan B gây ra.Ổ bệnh gan.2017; 47 (4): 312-320.doi: 10.1111 / hepr.12739
11. Halle PR, Foster F., Kudo M. và cộng sự.Sinh học và ý nghĩa của alpha-fetoprotein trong ung thư biểu mô tế bào gan.Gan int.2019; 39 (12): 2214–2229.doi: 10.1111 / liv.14223
12. Omata M, Cheng AL, Kokudo N, et al.Hướng dẫn lâm sàng điều trị ung thư biểu mô tế bào gan ở khu vực Châu Á - Thái Bình Dương: Cập nhật năm 2017.Tổ chức quốc tế về bệnh gan.2017; 11 (4): 317–370.doi: 10.1007 / s12072-017-9799-9
13. Xu Fei, Zhang Li, He Wei et al.Giá trị chẩn đoán của PIVKA-II huyết thanh đơn độc hoặc kết hợp với AFP ở bệnh nhân Trung Quốc bị ung thư biểu mô tế bào gan.Bỏ đánh dấu.Năm 2021; năm 2021: 8868370.doi: 10.1155 / 2021/8868370
14. Durin L., Praradines A., Basset S. và cộng sự.Ung thư phổi không tế bào nhỏ Sinh thiết dịch thể không huyết tương: gần khối u hơn!tế bào.Năm 2020; 9 (11).doi: 10.3390 / cells9112486
15. Mader S, Pantel K. Sinh thiết chất lỏng: tình trạng hiện tại và triển vọng trong tương lai.Điều trị Oncol Res.2017; 40 (7-8): 404-408.doi: 10.1159 / 000478018
16. Palmirotta R, Lovero D, Cafforio P, et al.Sinh thiết ung thư dựa trên chất lỏng: một công cụ chẩn đoán đa phương thức trong ung thư học lâm sàng.Adv Med Oncol.2018; 10: 1758835918794630.doi: 10.1177 / 1758835918794630
17. Mandel P., Metais P. Các axit nucleic trong huyết tương người.CR Seances Soc Biol Fil.Năm 1948; 142 (3-4): 241-243.
18. Mouliere F, Chandrananda D, Piskorz AM, và cộng sự.Nâng cao phát hiện DNA khối u tuần hoàn bằng phân tích kích thước đoạn.Khoa học dịch y học.2018; 10: 466.doi: 10.1126 / scitranslmed.aat4921
19. Underhill HR, Kitzman JO, Hellwig C. et al.Chiều dài đoạn DNA khối u tuần hoàn.Gen PLOS.2016; 12 (7): e1006162.doi: 10.1371 / journal.pgen.1006162
20. Cheng F, Su L, Qian C. DNA khối u tuần hoàn: một dấu ấn sinh học đầy hứa hẹn trong sinh thiết ung thư dựa trên chất lỏng.đích khối u.2016; 7 (30): 48832–48841.doi: 10.18632 / oncotarget.9453
21. Bettegovda S., Sauzen M., Leary RJ và cộng sự.Phát hiện DNA khối u lưu hành trong giai đoạn đầu và giai đoạn cuối của khối u ác tính ở người.Khoa học dịch y học.2014; 6 (224): 224ra24.doi: 10.1126 / scitranslmed.3007094
22. Mehes G. Sinh thiết chất lỏng để phân tích dự đoán đột biến của ung thư thể rắn: quan điểm của nhà nghiên cứu bệnh học.J Công nghệ sinh học.2019; 297: 66-70.doi: 10.1016 / j.jbiotec.2019.04.002
[PubMed] 23. Lenarts L, Tuveri S, Yatsenko T, et al.Phát hiện sớm khối u bằng sàng lọc DNA huyết tương lưu hành: cường điệu hay hy vọng?Luật lâm sàng của Bỉ.Năm 2020;75 (1): 9-1 doi: 10.1080 / 17843286.2019.1671653
24. Nishida N. Ảnh hưởng của virus viêm gan và sự lão hóa lên sự methyl hóa DNA trong quá trình hình thành ung thư gan ở người.Mô bệnh học.2010; 25 (5): 647–654.doi: 10.14670 / HH-25.647
Thời gian đăng: 23-09-2022
